四小名助如约而至,给大家带来色谱耗材相关的实用技术小贴士。内容涉及色谱柱及前处理产品选择、使用、维护保养等内容。实用干货,不容错过! 双特异性抗体(Bispecific Antibody)因其能同时特异性结合两种抗原或者两个表位的抗体分子,可以发挥两种单抗联合的协同作用,成为当下最热门的新药研发方向之一。其作用机制主要包括介导免疫细胞杀伤、双靶点信号通路阻断以及促进蛋白形成功能性复合体三种。这些优异的特性使得各大制药巨头加码在双抗布局,国内企业在双抗领域也联袂上演了组合疗法的大戏。作为近十年才逐渐开始的商业化的技术器。商业前景值得最期待! 但是双抗的错配问题,稳定性以及在生产过程中如何平衡两种抗体的表达量成为了大家共同关注的焦点,快速精确的找到双特异性抗体的表征方法也成为广大药物研发人员工作的重头戏,小编分享给大家一部分我们的数据,希望能够在双抗表征中大家可以事半功倍,工作更加得心应手。 含Fc片段的双特异性抗体结构类型如下: (点击查看大图) 不含Fc片段双特异性抗体结构类型如下: (点击查看大图) 本篇主要分享使用疏水分离模式和阳离子交换pH梯度模式将不同轻重链结合的IgG like型双特异性抗体分离出。 MAbPac HIC-20 5μm 4.6mmX100mm 色谱柱检测轻重链错配的双特异性抗体 (点击查看大图) 分析条件与实验结论 色谱柱 MAbPac HIC-20 5μm 4.6 mmX100 mm 流动相A 2.0 mol/L (NH4)2SO4+100 mmol/L PB(pH7.0) 流动相B 100 mmol/L PB(pH7.0) 梯度条件 40%-100%B 14分钟线性梯度 柱 温 30℃ 流 速 1mL/min 进样体积 20 μL 检测波长 UV 280nm 实验结论 ProPac Elite WCX 5μm 4.0X150+CX-1 Buffer 分析错配的双特异性抗体 (点击查看大图) 分析条件与实验结论 色谱柱 ProPac Elite WCX 5μm 4mmX150mm 流动相A CX-1 Buffer A 流动相B CX-1 Buffer B 梯度条件 40%B-55%B 15分钟线性梯度 进样体积 2 µL 检测波长 280 nm 柱温 40℃ 流速 0.8 mL/min 实验结论 相对于单抗,双特异性抗体的表征有着更多的挑战,相信我们丰富完整的产品线和海量的应用,助力您新型生物药物的质量表征!
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